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液相保護(hù)柱在高效液相色譜(HPLC)分析中扮演著重要角色,特別是在處理色素、防腐劑等復(fù)雜樣品時(shí),其預(yù)處理效果直接關(guān)系到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的使用壽命。以下是對(duì)液相保護(hù)柱在色素、防腐劑高效預(yù)處理方面的詳細(xì)探討:一、液相保護(hù)柱的作用1.延長(zhǎng)色譜柱壽命:保護(hù)柱能夠阻擋樣品中的顆粒和雜...
分析保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長(zhǎng)分析柱使用壽命。保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間,作用主要兩方面:1.截留不溶性顆粒2.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)以下幾種情況建議使用保護(hù)柱:1.中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復(fù)雜的樣品分析——因溶解性差異導(dǎo)致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴(yán)重,梯度洗脫時(shí)影響更大。2.生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染,保護(hù)柱可先于分析柱承受這種污染,從而延長(zhǎng)分析柱壽命。保護(hù)柱很重要,但選擇合適的保護(hù)柱...
UHPLC是一種專門的色譜方法,與HPLC相比,它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC通過(guò)使用填充較小顆粒(通常直徑小于2µm)的較小色譜柱來(lái)實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠UHPLC從混合物中分離不同類型的分子——無(wú)論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學(xué)物質(zhì)。盡管UHPLC的性能明顯更好,但它并不總是*。在您考慮改用UHPLC時(shí),恒譜生將幫助您區(qū)分重要和不重要的內(nèi)容。一、為什么選擇UH...
制備柱具有各種尺寸,可以實(shí)現(xiàn)高分辨率分析和快速的分析。在制備色譜中,達(dá)到高純度、高回收率和高通量的分離十分重要。制備柱主要應(yīng)用在植物化學(xué)、藥物合成、生物化學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品的提取及純化工作中。不同的工作領(lǐng)域中組分的制備和純化量的差異較大。在生物技術(shù)領(lǐng)域中,酶的分離是μg級(jí);在天然產(chǎn)物化學(xué)和合成化學(xué)領(lǐng)域中,為應(yīng)對(duì)未知成分定性鑒別、結(jié)構(gòu)測(cè)定、生物活性測(cè)試等要求,需要純化若干mg級(jí)的高純物;在藥品和醫(yī)藥學(xué)測(cè)試中,需要g級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品;在工業(yè)級(jí)提純中,目標(biāo)產(chǎn)物工業(yè)化生產(chǎn)往往需要kg級(jí)...
一、分離模式選擇色譜柱的首要任務(wù)是選擇分離模式。分離分子的方法有很多,其中應(yīng)用*泛的包括反相、正相、親水相互作用、離子交換和尺寸排阻HPLC。還有一些不太常見(jiàn)但更專業(yè)的分離模式,例如使用手性固定相或流動(dòng)相的特定手性色譜。反相色譜柱通常用于非極性或弱極性有機(jī)化合物,它包含非極性固定相(如C18),通常與極性流動(dòng)相配對(duì)。恒譜生C18AQ反相色譜柱在水下?lián)碛?產(chǎn)品的壽命,適于極性較大的物質(zhì)在高水相條件下的分析。但是該方法不適合應(yīng)用于蛋白質(zhì),流動(dòng)相通常含有低pH值的乙腈或甲醇,可能會(huì)...
當(dāng)保護(hù)柱或色譜柱的壓力漸升時(shí),可通過(guò)以下方法對(duì)問(wèn)題配件進(jìn)行清洗再生。注意:清洗色譜柱時(shí)需要將保護(hù)柱和抑制器、電導(dǎo)池取下,連接順序是泵→六通閥→色譜柱(需要反接)→廢液管;清洗保護(hù)柱時(shí)需要將色譜柱和抑制器、電導(dǎo)池取下,連接順序是泵→六通閥→保護(hù)柱(需要反接)→廢液管親水性離子污染按以下步驟沖洗(流量0.5mL/min)1、反接柱子(保護(hù)柱或色譜柱)注意:一定要將抑制器從流路中斷開(kāi),避免損壞抑制器。2、100分鐘:10倍淋洗液濃度的溶液(起清洗作用的主要是Na2CO3)3、100...
將色譜柱保持在最佳狀態(tài)將大大有助于改進(jìn)和標(biāo)準(zhǔn)化您的分離操作,同時(shí)確保色譜柱的使用壽命。您可以采取以下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。一、注意清潔。如果您從一開(kāi)始就注意并定期清潔,那么色譜柱的使用壽命會(huì)更長(zhǎng)。清潔色譜柱所需的溶劑、酸或堿的類型取決于它們的設(shè)計(jì)和吸附劑的具體類型。雖然有些色譜柱需要使用氫氧化鈉,但該溶液會(huì)損壞其他色譜柱中的吸附劑。請(qǐng)按照色譜柱的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。二、儲(chǔ)存條件也很重要。很多人沒(méi)有考慮如何存儲(chǔ)液相色譜柱,細(xì)菌會(huì)在緩沖液的中性環(huán)境中成長(zhǎng)。通過(guò)水流過(guò)色譜柱來(lái)防止細(xì)菌生長(zhǎng)...
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