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在前幾期文章中，我們討論了HPLC和GC的不同之處—?dú)庀嗌V（GC）和高效液相色譜（HPLC）有何不同？（點(diǎn)擊可查看原文）在這期文章中我們將討論HPLC和GC之間相同的功能，再一次深入學(xué)習(xí)他們之間的共通性。1.基本原理相同分離混合物的成分，對(duì)其進(jìn)行識(shí)別和定量是這兩種技術(shù)的共同基本目標(biāo)。最大的相同點(diǎn)就是：它們都是利用物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中分配系數(shù)不同而分離的。2.流動(dòng)相的作用HPLC和GC儀器使用時(shí)都需要用到流動(dòng)相，流動(dòng)相起著相同的作用：將需要檢測(cè)的組分以順序的方式運(yùn)輸?shù)綑z測(cè)器...

高效液相色譜法中，對(duì)色譜圖分析是很重要的。你可以將色譜圖看成一個(gè)橫縱坐標(biāo)為時(shí)間與數(shù)據(jù)的二維圖。固定相則是像海綿一樣的柱子，里面很多孔洞讓樣品流動(dòng)，由于每個(gè)樣品物質(zhì)的吸附能力不同，在色譜圖中會(huì)有不同的峰形。保留時(shí)間是樣品通過(guò)高效液相色譜柱所需要的時(shí)間，你在使用相同的流動(dòng)相和色譜柱分析同一樣品時(shí)，出現(xiàn)的保留時(shí)間應(yīng)該是固定的。如果保留時(shí)間不同可能是里面有雜質(zhì)造成影響。在液相色譜分離過(guò)程中，容易出現(xiàn)色譜圖中未出峰、一個(gè)或者多個(gè)峰是負(fù)峰、寬峰、雙峰、拖尾峰等問(wèn)題，我們稱之為鬼峰。鬼峰來(lái)...

選擇用作HPLC分析流動(dòng)相的溶劑是色譜分析過(guò)程的關(guān)鍵步驟。到現(xiàn)在為止，沒(méi)有一種能夠滿足所有分析需求的通用溶劑，而且根據(jù)分析要求所使用的溶劑組合會(huì)變得更多。選擇合適的溶劑是根據(jù)其物理性質(zhì)以及與樣品、色譜柱固定相的相容性。流動(dòng)相溶劑選擇的一般要求是：溶劑應(yīng)當(dāng)是高純度，溶劑與固定相不互溶，并能保持色譜柱的穩(wěn)定性，建議使用純水或者液相色譜專用的溶劑；溶劑的性能與使用的檢測(cè)器應(yīng)當(dāng)匹配；溶劑對(duì)樣品應(yīng)有足夠的溶解能力，樣品要*溶于流動(dòng)相。如果有不溶的樣品將導(dǎo)致流動(dòng)相分離或懸浮，會(huì)導(dǎo)致后續(xù)一...

目前已知的化合物中，80%都需要用高效液相色譜法來(lái)分析，它以快速、高效、靈敏度好、分離效率高和適用范圍廣等特點(diǎn)在各領(lǐng)域成分測(cè)定中得到肯定與使用，藥典將液相色譜法作為許多成分測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)分析方法。高效液相色譜法是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的，HPLC的不同之處在于，它需要更加粒徑小的色譜硅膠填料，更高壓力的泵、柱效更好的高效色譜柱。粒徑更加小的色譜填料意味著能有更高的柱效，但是這樣也帶來(lái)液相系統(tǒng)內(nèi)部壓力增大的問(wèn)題。系統(tǒng)內(nèi)部壓力高，對(duì)泵、色譜柱、保護(hù)柱、管路都是一個(gè)考驗(yàn)。uH...

液相色譜柱在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用，是色譜分析的核心部件。正確使用和維護(hù)色譜柱尤為重要，使用不當(dāng)會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從幾個(gè)方面簡(jiǎn)答介紹液相色譜柱在使用過(guò)程中應(yīng)當(dāng)著重注意的問(wèn)題。一、避免壓力和溫度的急劇變化溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。二、避免直接改變?nèi)軇┑慕M成在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是，應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，...

流動(dòng)相被稱為HPLC系統(tǒng)的生命線，它起著至關(guān)重要作用：將樣品輸送通過(guò)分離柱，然后輸送至檢測(cè)器以鑒定分離出的成分。流動(dòng)相通常很少是單一的溶劑，它是水與有機(jī)溶劑相組合制成，比如水與極性溶劑的緩沖液或有機(jī)溶劑按所需比例混合組成。常用的兩種操作模式是：等度洗脫—在等度模式下，流動(dòng)相的組成在整個(gè)分析過(guò)程中保持不變。即混合物中溶劑的比例是預(yù)先確定的，并且在分析過(guò)程中只使用這一種流動(dòng)相溶劑。梯度洗脫—通過(guò)軟件以預(yù)定模式通過(guò)分析運(yùn)行改變組成，運(yùn)行結(jié)束時(shí)溶劑的比例與初始比例不同。在進(jìn)行色譜分析...